Impureses de semaglutida

Impureses de semaglutida|Control d'impureses de simeglutida|Confirmació d'estructura i síntesi personalitzada d'impures|Ciència-pèptid

Control d'impureses de Soma Lutide (Simeglutide) - per a GLP-1 estudi de qualitat de fàrmacs, presentació de fàrmacs genèrics. Ciència-Peptide proporciona una síntesi personalitzada d'impureses relacionades amb Soma Lutide, inclosos pèptids que falten, impureses oxidades, productes d'exfoliació d'àcids grassos, dades de confirmació estructurals relacionades amb la cadena PEG, etc. Podem donar suport a la investigació del vostre perfil d'impureses. Benvingut a contactar amb nosaltres.

La semaglutida (també coneguda com a semaglutida) ha estat en flames aquests anys. Novo Nordisk confia en ella per empènyer el valor de mercat al segon fabricant nacional de genèrics de pèptids del món, gairebé no, sense mirar-ho. La forma de dosificació oral i la forma de dosificació injectable són tots grans mercats. Després de la caducitat de la patent, qui pot fer primer la investigació de qualitat, qui tindrà l'oportunitat d'agafar el primer genèric.

 

Tanmateix, l'estudi de la qualitat de la somatostatina és, francament, més difícil que el de molts pèptids. És un 31-pèptid amb una cadena d'àcids grassos (àcid octadecandioic) i un enllaç PEG. Aquesta estructura determina que el seu espectre d'impureses és especialment ric - pèptids que falten, impureses oxidades, productes d'eliminació d'àcids grassos, impureses relacionades amb la cadena PEG, dímers cadascun han de tenir un control, cadascun ha de ser clar. Especialment la cadena PEG, que no es troba en pèptids normals, és exclusiva de Somalutide.

 

Hem acumulat molta experiència en la síntesi d'impureses de pèptids complexos. Ens hem especialitzat en l'estudi de la somatostatina, i sabem quines són les dificultats en el seu perfil d'impureses i quins són els elements essencials de control. Podem personalitzar la síntesi de diversos controls d'impureses de Semaglutide segons les vostres necessitats, amb dades de confirmació estructural, i ajudar-vos a establir el mètode, de manera que serà menys probable que se us emeti un suplement en la presentació.

L'estructura molecular de la somatostatina determina que el seu perfil d'impureses és molt més complex que el dels pèptids normals. Quan fem estudis d'impureses, ens centrem principalment en aquestes categories:

Falta pèptid
Els 31 aminoàcids, qualsevol dels quals es perd durant el procés de síntesi, són una impuresa. Els temps de retenció dels pèptids que falten a HPLC es van distribuir àmpliament, amb diferent polaritat dels pèptids que falten en diferents posicions. Alguns falten a l'extrem N-, alguns al mig i altres a prop del lloc d'unió d'àcids grassos. Hem rebut una comanda d'un client que va demanar una dotzena de pèptids que falten en diferents posicions per localitzar totes les possibles impureses que falten en el seu procés.

Impureses oxidants
La somalutida té metionina (Met) en la seva seqüència, que és susceptible a l'oxidació a sulfòxid i després a sulfona. Les impureses oxidades sovint apareixen en estudis d'estabilitat i creixen després d'un període de temps. Hem fet una comparació, en condicions accelerades durant un mes, el pic d'oxidació pot créixer fins a més del 0,3%, sense control.

Productes d'eliminació d'àcids grassos
La cadena lateral d'àcids grassos (àcid octadecandioic) de la somatostatina s'uneix a la lisina mitjançant un enllaç, i aquesta modificació es pot eliminar parcialment durant la síntesi o l'emmagatzematge. De manera més problemàtica, el despreniment es pot produir en diferents llocs - entre l'àcid gras i l'enllaçador, i entre l'enllaç i el pèptid - donant lloc a diferents impureses. Hem sintetitzat diverses impureses-relacionades amb els àcids grassos per als nostres clients, que van des de l'eliminació completa fins a només una petita secció.

Impureses-relacionades amb la cadena PEG
Aquest és el tipus d'impuresa més específic de la somatostatina. Té un enllaç PEG (polietilenglicol) i la cadena PEG es pot trencar, escurçar o polimeritzar durant la síntesi, donant lloc a una sèrie d'impureses relacionades. Aquestes impureses no es troben en pèptids normals, però són úniques de la somatostatina i són difícils d'estudiar en estudis de qualitat. Hem fet diverses variants de la supressió de la cadena PEG, l'escurçament de la cadena PEG i l'oxidació de la cadena PEG.

Dímers/polímers
Dues o més molècules de somatostatina s'agrupen per formar un dímer o superior. El pes molecular del dímer és el doble que el del pic principal, i sovint és un pic ampli en HPLC, de manera que s'ha de separar i purificar especialment abans que es pugui utilitzar com a control. Hem fet la preparació de dímers, i es van necessitar diverses rondes de purificació per aconseguir una puresa de més del 95%.

Impureses desamidades
L'asparagina (Asn) i la glutamina (Gln) es desamidan fàcilment en condicions àcides o de calor, donant lloc a isòmers. Hi ha diversos Asn i Gln a la seqüència de la somatostatina, i la impuresa de desamidació apareix sovint a la prova de degradació forçada, de manera que s'ha d'utilitzar el producte de control per localitzar la impuresa.

Diastereoisòmers
Durant la síntesi de cadena llarga, els aminoàcids individuals poden patir racemització, donant lloc a diastereoisòmers. El contingut d'aquest tipus d'impureses no sol ser elevat, però els experts preguntaran quan declarin, i és millor tenir un producte de control per a la confirmació.

Moltes d'aquestes impureses no es poden comprar i s'han de sintetitzar personalment. Ja hem fet molts projectes sobre la personalització d'impureses de somatostatina, que cobreixen totes les categories anteriors.

La supressió de la sèrie de pèptids
We synthesize whatever is missing. For example, the lysine at position 20 is missing, or the amino acid near the fatty acid attachment site is missing. We will synthesize according to your process impurity profile, and the purity is usually >95%, amb confirmació de MS i RMN. Hem sintetitzat un conjunt de pèptids amb un espai de 5 aminoàcids des del N-terminal fins al C-terminal.

Impureses oxidants
Met in Somatostatin is oxidized to sulfoxide or sulfone, and we can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control product. We can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control product. The purity of the product is >95%, i podem proporcionar l'espectre LC-MS per confirmar el grau d'oxidació. El sulfòxid i la sulfona es separen per HPLC, i podem fer les dues coses.

Productes d'eliminació d'àcids grassos
Aquest és el focus principal de les impureses de Somalutide. La cadena d'àcids grassos pot estar totalment o parcialment desplaçada. Podem sintetitzar una sèrie de variants per a diferents posicions de vessament. En un dels projectes més complicats que hem fet mai, el client ens va demanar que sintetitzéssim una impuresa amb 6 carbonis que falten a la cadena d'àcids grassos, i vam trigar dos mesos a fer-ho bé.

Impureses-relacionades amb la cadena PEG
Aquesta és una de les impureses més difícils de la somatostatina, i també és la nostra força. La cadena PEG pot faltar, escurçar-se, trencar-se, oxidar-se i es poden produir diverses variants. Hem fet la impuresa amb la cadena PEG que falta completament (és a dir, somatostatina de-PEGilada), la variant amb la longitud de la cadena PEG a la meitat i el producte amb la cadena PEG oxidada. El client va rebre aquests controls i es va establir completament l'espectre de la impuresa relacionada amb PEG-.

Dimer
Els dímers formats per-enllaços creuats o interaccions no-covalents es poden preparar mitjançant diferents mètodes i aïllar-los i purificar-los per proporcionar controls d'alta puresa. Els dímers són laboriosos de purificar, però tenim l'experiència per saber separar els monòmers.

Impureses desamidades
Per als llocs Asn i Gln de la seqüència, podem preparar controls d'impureses desamidats mitjançant degradació forçada o síntesi dirigida. La diferència de pes molecular després de la desamidació és només 1, cosa que no és fàcil de distingir per MS, de manera que normalment utilitzem RMN o condicions cromatogràfiques especials per confirmar.

Dher impureses personalitzades
Si trobeu una nova impuresa desconeguda a la vostra recerca, us podem ajudar a analitzar l'estructura i sintetitzar-la. Envieu-nos la mostra, farem l'anàlisi LC-MS, especularem l'estructura, després la síntesi direccional i després compararem el temps de retenció i l'espectre de masses per confirmar l'acord. Hem fet aquest procés moltes vegades i la taxa d'èxit és força alta.

Desenvolupament i validació de mètodes analítics
Quan es configura un mètode HPLC o LC-MS, cal un control d'impureses per a la localització, la determinació de la separació, la verificació del rang lineal i la recuperació. Sense el control, a la validació del mètode li falta una peça. Molts clients ens demanen que primer fem algunes impureses clau per configurar el mètode i, a continuació, recuperem la resta.

Espectrometria de masses heterogènia
Quan es declara un medicament genèric, es requereix una anàlisi qualitativa i quantitativa integral de les impureses del procés i dels productes de degradació. La ubicació, el contingut i l'estructura de cada impuresa s'han de confirmar mitjançant un producte de control. Hem vist que la declaració de la informació es va enviar per compensar, nou de cada deu vegades és que les impureses d'aquesta peça no entenen.

Estudis d'estabilitat
En proves d'estabilitat-a llarg termini i accelerades, cal determinar quins productes de degradació són dominants i quina és la tendència del contingut. Amb un control d'impureses, és possible quantificar i controlar amb precisió. Un client estava fent l'estabilitat de la preparació de la somatostatina i va trobar que un pic de degradació creixia ràpidament en condicions accelerades, així que el vam analitzar per MS i el vam sintetitzar per confirmar l'estructura, i després el client es va sentir alleujat d'informar-ho.

Prova d'alliberament per lots
Després de la comercialització, cada lot d'API o formulació s'ha de provar per a la substància en qüestió. Els controls d'impureses són eines essencials per a les proves d'alliberament.

Informació sobre declaracions de medicaments genèrics
Els estudis d'impureses són una secció clau de la informació de presentació. Proporcionar un perfil complet d'impureses i dades de control redueix significativament el risc d'una publicació de revisió.

Cas 1: una empresa farmacèutica, programa de medicaments genèrics Somalutide
Estan desenvolupant una versió genèrica de la somatostatina i necessiten un conjunt complet de controls d'impureses per a la validació del mètode. Hem personalitzat 15 impureses per a ells: 6 pèptids que falten, 2 impureses oxidades, 1 dímer, 2 productes d'exfoliació d'àcids grassos, 3 impureses relacionades amb la cadena PEG i 1 impuresa de desamidació. La puresa de cadascun era superior al 95%, amb dades de MS i RMN. El responsable del projecte va dir: "Les impureses de Somalutide són més complicades que altres pèptids, especialment el PEG, que hem estat buscant diverses empreses, però tots van dir que no ho podien fer. Però ho vau poder fer tot i les dades estaven completes, la qual cosa va ser de gran ajuda". Posteriorment, la validació del seu mètode es va completar amb èxit i ara s'estan preparant per a la presentació.

Cas 2: A CRO, estudi especial sobre impureses a la cadena PEG
Van dur a terme un projecte d'investigació de qualitat sobre la somatostatina, que va requerir una anàlisi exhaustiva de les impureses associades a la cadena PEG. Hem sintetitzat sistemàticament les impureses relacionades amb PEG-: absència completa de cadena PEG, reducció a la meitat de la longitud de la cadena PEG, oxidació dels extrems de la cadena PEG i trencament de la cadena PEG en dues parts. va sintetitzar un total de 8 impureses relacionades amb PEG-. El client va utilitzar aquests controls per establir un conjunt complet de mètodes de detecció d'impureses PEG, que es va convertir en el punt culminant de la seva informació de presentació.

Cas 3: Estudis d'estabilitat, empresa de biotecnologia
Estaven fent un estudi d'estabilitat de la formulació de la somatostatina i van trobar que el contingut d'un producte de degradació augmentava ràpidament en condicions accelerades, però no sabien què era. Vam analitzar la mostra mitjançant LC-MS, vam suposar que es tractava d'un àcid gras que vessava impureses en un lloc determinat, i després la vam sintetitzar de manera específica i la vam confirmar per comparació. Van establir un assaig amb aquest control i van controlar amb precisió la tendència d'aquest producte de degradació. Posteriorment, en presentar l'informe, aquesta part de les dades va ser remarcada pels experts, i per les dades sòlides no es va emetre cap indemnització.

La somatostatina és un producte molt popular, però l'estudi d'impureses és un treball delicat, especialment les impureses relacionades amb la cadena PEG i els productes d'exfoliació d'àcids grassos, que molts fabricants no poden gestionar. Si esteu fent recerca de qualitat o desenvolupament genèric de somatostatina i necessiteu un control d'impureses, us convidem a parlar amb nosaltres. Hem fet molta feina, sabem quines són les dificultats i sabem com superar-ho.